201310030919Limoges
6/29 (lundi)
在早上時抵達阿姆斯特丹，再從阿姆斯特丹轉機到巴黎
到巴黎時已經接近中午 資玩午餐後 我們在巴黎-Austerlitz火車站搭火車前往前往Liomges-BENEDICTI 火車站
到了Limoges火車站之後 Mr. krausz和Mr. Vincent sol前來迎接我們到Limoges大學(Universite de Limoges)
Mr. krausz和Mr. sol皆是學校的教授
在LCSN(Laboratoire de Chimie des Subtances Naturelles)裡指導學生
到學校之後 Mr. Vincent sol也很熱情的幫我們處理住宿的問題 真的非常謝謝這兩位教授
由於將近一天的航程 到法國不免感到有些疲憊 而與教授們的聚餐也延遲到明天晚上
調適好身體狀態 再開始一個不一樣的體驗吧！
6/30 (Mardi)
早上我吃了早餐並到家樂福去採購生活必需品，
採購完之後到實驗室是連結網路到我的電腦，結果試不通，還蠻不方便的。
到了晚上我們與Mr. krause和Mr. Vincent sol到法國餐廳用餐，
這是我第一次到外國餐廳 並與外國人一同用餐 和在台灣餐廳裡用餐有大大的不同
到了點菜時 一開始給我們的法國菜單 內容都看不懂；換了英文菜單之後 雖然有懂 但是並不多
Mr. krause和Mr. Vincent sol在旁邊幫我解釋菜單上的內容 非常的有趣。
法國人通常花較長的時間來進行用餐，開胃菜、主菜及甜點，
他們喜歡邊品嘗美食邊與身邊的人聊天，步調放比較慢，比較享受生活
用餐後後 我們也在市中心散步了一會兒，並接我們回學校，結束這愉快的一天。
7/1 (Mercredi)
下午 Mr. Vincent GLOAGUEN帶我參觀了生物技術館裡的實驗室
Vincent GLOAGUEN是一位教授同時工作於 A.V.R.U.L
A.V.R.U.L 是一個公司的縮寫
全名為Agency for the economic development of the Limousion university research.
意指A.V.R.U.L是將Limousion大學研究成果的產值化的代表機構
該機構的任務就是發現能將研究成果產值化的計畫，以驗證和支持這些計畫的發展和成熟。
而其中一個部門“Incubator” 該機構的任務是支持建立創新項目、輔導初創企業的大學實驗室
Mr. Vincent向我介紹實驗室裡的基因轉殖植物
一種能吸收重金屬離子並轉換成對環境無害的有機物的植物
另一種則是從樹幹中取得多醣體來培養觀察植物的生長好壞
晚上我們加入了一個教授與學生共同參與的盛宴
7/2 (Jeudi)
I go to the Incubator and attend the meeting with Mr. Vincent today.
It is a pity that they use French to discussion,
I can not understand except that Mr. Vincent explains the content.
We talk about lab experiment and chat about type of life when we have a lunch.
I also attend the conversation with his students.
I know about difference between foreign students and Taiwan ’s student.
Meeting內容探討在Limoges地區發展的生物科技的資金來源分配
由BioCRITT單位及政府人員所參與
BioCRITT (Bio Research For Innovation Transfer Technology)
BioCRITT 的領域為 接合產品和廢料的處理與回收利用
它是一個技術協會已服務於企業和地方當局18年
它具有雙重作用
1.以符合立法和現有技術以較低的成本來解決公司的廢物處理問題
2.促進公司技術轉移讓後者(當地企業)能跟上技術的進步
Bio CRITT的任務在Limosin地區包括4個部份：
‧建議
為了幫助公司正規化的要求。提供專家和培訓
顧問的網絡，並依照該公司的每一步進展的方式。
‧研究和專家評估
技術上的可行性，加工驗證和優化議定書等。
‧研究與發展
CRITT參與了該公司提供的技術支持下進行應用研究，促進
實驗室到產業的轉型。
‧分析
Bio CRITT的3個主要服務提供給該公司(常規分析，量身定制的解決方案和產品特性)
7/3 (Ventdredi)
We attend a PhD defense.
It’s an opportunity of practice. Although I don’t understand the content.
In the afternoon Jacques Christen come here to discuss about my training.
Mr. Jacques Christen 是A.V.R.U.L執行總經理
主導AVRUL整個運作方式的執行總長
7/6 (Lundi)
今天 Mr.GLOAGUEN 約好要前往一個育馬場
同行的有藥學系教授 Mr.Cardot及avrul執行長 Mr.Christen
搭上Mr.Christen的車，前往離LIMOGES大學約70公里外的Pompadour
來到一個名為"Les Haras Nationaux "的機構
"Les Haras Nationaux" 是一個類似財團法人的機構，與Limousin政府農業部合作。
主要為管理馬匹及馬匹所有權。並有開始拓展跨國合作的目標。
內容包括：馬的培育、如何保持優良狀態、餵食看護，育種等。
也提供對於馬匹所有人、法律程序的訓練
由於無法參與教授視訊座談會
所以"Les Haras Nationaux "的實驗室負責人 Laurence Wimel
將我安排給另一個女士 向我講解"Les Haras Nationaux "的內容組織及管理
"Les Haras Nationaux " 詳細紀錄每匹馬的出生、所有權和健康狀況
每匹馬出生時皆植入晶片，並記載其相關資料，
如有所有權更動或發生重大事故等，皆要重新植入晶片加入新的資料。
仲介則是它的一小部分 當馬的所有權轉交時，交由獸醫檢查，將其資料正確詳細的記載，
並轉交給下一任主人，以免資料不符而使後續的途徑觸及到法律。
馬又細分為三種用途：騎乘、拖拉和競賽用。
面對不同的種類馬匹的管理 各個步驟更不能馬虎。
"Les Haras Nationaux"對外也設有偏向育樂的活動
飼養馬匹的建築由舊城堡改建而成 算是一個特別的觀光景點
有解說員介紹馬在法國歷史的中的經過 同時也有賽馬場及各種騎馬競賽表演等
由於“育馬”此領域擁有相關可觀的商業價值，
因此Mr. GLOAGUEN、Mr. Jacques及Mr. Cardot來此地開會
Mr. Cardot是藥物企業聯盟負責人 負責與業界聯盟並幫忙聯盟
他對育馬過程中，提出部分飲食對馬的培育有較佳的影響
Mr. Jacques及Mr. Vincent則與此產業合作有一段時間，討論對育馬是否有更好的改善方案
7/7 (Mardi)
今天跟教授 GLOAGUEN、Charlotte和一位生科教授
到Les Jardins SOTHYS.
參加一個生物科技研討會
來這裡的目的是尋找是否能將研究成果產值化的目標
主持人分別解說4段Powerpoint介紹生物科技
內容：
1.生物科技概論
2.綠色生物科技(BIOTECHNOLOGIES VERTES)(基因改造食品..等)
3.白色生物科技(BIOTECHNOLOGIES ROUGES)(生物能、生物可分解塑膠..等)
4.紅色生物科技(BIOTECHNOLOGIES BLANCHES)(醫藥生物科..等)
午餐後 參觀了餐廳主人所建設的花園
餐廳與花園為營利設施 這筆經費可拿來做研究用途
Les Jardins SOTHYS
SOTHYS AURIAC公司是以植物為基礎的活性物質特性用於化妝品市場的研究，開發，生產和銷售
SOTHYS SAURIAC的開發基於植物的活性物質，使用環保、綠色化學
方法結合實驗室並專注於自然物質的開發。
該公司有一個小團隊的科研人員組成：化學家，生物學家和化妝師。
SOTHYS SAURIAC開發領域的過程中使用綠色化學提取的
表徵和純化以植物為基礎的分子和專業知識，側重於植物萃取物應用於化妝品行業。
7/8 (Mercredi)
下午參加博士論文演講
了 解 博士是如何通過與講評的答辯
演講內容為結合生物與化學領域而造出的抗癌藥物
第一次參與正式的博士論文答辯
研究生們研究一個主題兩到三年，用自己的知識和實驗所得到的結果
站在台上發表，並與主審教授進行答辯，所有努力成果都在今天一一展現。
想必站在台上的主講者，心情必定相當的複雜，但我想一定會感到一絲的驕傲吧！？
說不定以後自己也會站在講台上發表自己的論文，這對我而言是一個很好的體驗！！
7/9 (Jeudi)
到E.S.T.E.R建築與ESTER主管Fabrice Macquet 見面
Fabrice Macquet是ESTER的代表和執行總長，負責掌管ESTER 人員的參與進出
他向我介紹建築的用途及發展。
Espace(Space)、Science、Technology 、Exchange、Research
由這5個單字縮寫成ESTER建築(科學和技術研究的交流中心)
ESTER是具有組織性的大樓
它支持創造力、創新和技術轉讓，並促進地區經濟和社會發展資源的一個交流中心 。
ESTER圍繞著五個專業領域：陶瓷材料和表面處理、電子和電信、水和環境、生物技術-健康和工程。
這些的基礎都建立在強大的科學和技術技能區域。環繞這些先進企業的一些機構
（如技術育成中心，商務中心，研究實驗室等）其競爭刺激了科技的發展。加強了其網絡的方式和區域發展。
專案經理Geraldine Laverdan談avrul 資金來源運作
AVRUL由歐盟、Limoges政府資助
至計畫提出後由AVRUL分配至 Incubator 在分配為計畫經費
觀賞Limoges 影片(介紹Limoges人口、地理位置、出產瓷器)
下午 與Youssef 談 Incubator的任務
Youssef在Incubator處理責任契約&智慧財產權
當實驗室提出計畫時，經commission評估是否為值得贊助的計畫，Incubator在學術教育機構或研究機構中，檢測和評估欲設立的計畫，如果計畫案通過後，會提供協助給公司計畫主持人在建立自己公司的期間，提供消息和介紹企業合作夥伴、金融或科學管理，並給予計畫主持人基本的培訓。
7/10 (Ventdredi)
與Incubator執行長Cloude LORY見面 他跟我介紹arvrul所提供協助及運作
Cloude原本為製造零件公司老闆，後來加入avrul
Incubator提供援助有
1.提供最低限度必要的基礎設施給每個計畫主持人
2.給予籌畫補助金，
3.制定業務計劃，
4.尋求資金來源，
5.聯繫大學或工程學院，
但如果沒有好的創新計畫 是無法成立公司， Avrul最長給予2年的訓練時間，
公司開始營利後，可每年歸還營利所得20%上限至回饋金額還清為止。
並跟我們介紹一些經由AVRUL輔導成立的公司
(如”COVERTIS”- 綠色化學的創新及服務┘、
“FILIGRANE” – 處理法國-中國的貿易經濟和文化交流的代理公司)
接而Cloude LORY像我們介紹馬文博 博士
她主修符號學、也是中法關係顧問
馬 博士是在avrul成立公司(FILIGRANE)的一個例子
下午 執行長與進行對帳的流程
追蹤是否有金錢處理上的錯誤，以繼續輔導其他公司
法國國慶日
7/14 星期二
今天是法國的國慶日
Vincent夫婦邀請我們一起度過這天
我們開車到了NIEUL這個自然風景區健行
它規劃了路線與時程表給名眾
我們走了兩個小時足足走了7.5公里
算是一次相當另類的異國健行
之後到Vinvent夫婦家裡享用晚餐
這是我第一次到法國人家裡用餐
雖然有語言上的間隔 但法國人總是會想辦法找出答案
來讓雙方明白，這是我覺得最特別的一點
用完晚餐後，我們到Limoges火車站 觀賞煙火
人潮非常的多 而煙火配上各種爵士樂及主題煙火的施放
那畫面是在現場才能親身感受的
法國國慶日！我度過很棒的一天！
7/15~7/21
7/15 星期三
參加PhD defense
題目是"合成短鏈的柳酸應用於治療上"
這是第二次參加PhD defense 這次的主講者是為男研究生
他很通順的講完他的研究成果 而主審教授 似乎也很認同他所演講的內容
7/16 星期四
在生物科技實驗室與Stephanie VALLERIN 作切斷多醣體的實驗
Stephanie VALLERIN 是在Sothys Auriac負責研究的單位
實驗目的為將從植物中取得的多醣體，切成單糖去做Gas chromatography來了解它是何種多醣體。
(將萃取出的多醣體放入九支試管內，至於冷凍乾燥機(Lyophilizer)內，使樣品呈除去水分的乾燥固體 (此步驟已執行完成)) 。
在一個密閉箱注入氮氣，等待10分鐘使它充滿氮氣，並通過橡膠手套到密閉箱內操作今天的實驗，各取1 ml甲醇與1 mlHCl放置在9支試管裡，加入HCl是利用酸來切斷多醣體，使各個單榶能接上甲基，防止逆反應。
讓各個試管充入氮氣並加蓋保存，由於是在密閉箱裡操作，又透過一層橡膠手套，而使這個實驗在操作時格外的困難且費時。
最後將9支試管放置到80度C的加溫爐中25小時，等待樣品揮發。
下午與研究生Cedric denis Astien進行樹幹粉末(Douglas fir bark)的IR檢驗
取0.18克的KBr 加0.0040克的樹幹粉末放入機器壓製薄片後進行IR檢測。
除了樹幹粉末外，我們同時比較了經碘酸鹽氧化、聚半乳糖酸還原後的樣品
樹幹粉末主要是纖維素由葡萄糖結合而成，但經過其他不同的化合物反應後，會改變葡萄糖的鍵結，放置IR儀器中檢測，比較相同片段會發現吸光值會有明顯的不同。
由紅外線圖譜中可以知道除了原始的樣品外，因結構改變後的樹幹樣品，吸收紅外線的頻率會有所改變，而得知是哪種化合物。
7/17 星期五
與Stephanie 接續昨天的實驗
我們將乾燥的9支試管加入1 ml heptane及1 ml methyl alcohol，在萃取多醣體的過程中，也會萃取出油脂(lipid)，而lipid難以作GC檢測，所以加入heptane使這些lipid溶在其中，在接上氮氣噴嘴將heptane及methyl alcohol 蒸發(蒸發時間約需20~30分鐘)，重複此步驟三次 (加入heptane及methyl alcohol 並吹乾試管內的溶液)，使lipid完全清除乾淨。
接著加入1 ml BSTFA及1 ml pyridine， BSTFA的 trimethyl group可以固定各個單榶並幫助揮發，pyridine在此則當成催化劑使用。
最後將樣品用鋁箔紙包住並放入加溫爐中(80度C、2小時)，等樣品注入GC中作檢測。
下午繼續與研究生Cedric deni 作樹幹的IR檢測，這次我們檢驗了不同濃度的樹幹粉末分別為鉛濃度200；400；800；1000；1500；2000；2500，鉛離子濃度不同而在相同片段的比較下，濃度最低的樹幹粉末其穿透度會明顯大於濃度最高者，加入不同鉛離子濃度的樹幹也可在藉由加入HNO3反應而還原到原本的樹幹粉末，所以這個實驗的樹幹粉末是可以重複在使用的。
7/20 星期一
和Stephanie 討論關於切斷多醣體的實驗
Stephanie在Sothys Auriac裡負責研究的單位
Sothys Auriac為LIMOUSIN地區的生物科技研究計畫之一
所以在LIMOGES大學提供的實驗室裡進行研究
至於問到是從何種植物萃取出的多醣體，
Stephanie說這是他們公司還在研究的目標，不能透露
而實驗的結果經由GC診測可以得知何種多醣體，對於抗氧化的效果為較佳的
她還向我展示再作此實驗前，樣品已經透過冷凍乾燥機(Lyophilizer)處理過，將水分去除。
與Cedric討論
Douglas(一種松樹)吸收Ca離子可產生更多的pectin和phenol化合物，並會產生較少的纖維素和半纖維素，(因為纖維素所含有的多醣體與Ca離子反應)。
植物會吸收某些金屬離子來發育(如Ca、Mg離子)，但植物無法辨別它所吸收的金屬離子，其中可能含有害的(Cd、Pb離子)，所以我們藉由改變植物成分中的結構，來讓植物能吸收更多的金屬離子。
他也舉了一個例子
EDTA(乙二胺四乙酸)，可以和金屬形成螯合物的有機化合物，可以用於污水處理，但對於人體和環境是有毒害的
7/22 (從木屑萃取纖維素&半纖維素)
7/22 (Mercredi)
今天與Charlotte MOINE及一位化學實驗室教授進行從木材中萃取出纖維的實驗
他們先跟我介紹了實驗的步驟與應用的化合物，及”COVERTIS”這個單位
而Charlotte MOINE服務於”COVERTIS”。
”COVERTIS”的領域包括
綠色有機化學的創新和研究服務並依照環境的方式促進利用可再生資源和綠色化學。”COVERTIS”由兩項機構支持，
為AVRUL的 Business Incubator 支持其金融、法律和管理發展及Limoges的LCSN以它的科學和技術支持”COVERTIS，在綠色化學方面的專業知識
在Limousin地區廢木料是一個重要的可再生自然資源。藉由利用LCSN的專業知識將木材分餾，提取與鑑定成分，這個項目的目的是開發新的產值化方式，如廢木料的樹皮和木屑。因此”COVERTIS”希望整合活動區域範圍內的木材副產品之產值化。
我秤50克木屑放入纖維濾紙中，並取1.2升的酒精放入燒杯中
提純的化合物在溶劑中有”有限的溶解度”而”雜質不溶於這種溶劑”的此項特性，就可以使用索式提取器進行提取。
7/23 星期四
上午繼續與Charlotte進行昨天的實驗
經過7小時的反應後 酒精因為濾出小分子而呈現深咖啡色。
接著我將木屑從纖維濾紙中挖出 放置到另一乾淨錐形瓶 配置1%的草酸銨溶液( 5g , 500m l) 加入錐形瓶中，將錐形瓶放到加熱器上並裝上冷凝管，此步驟是要去除木屑中果膠(pectin)，因木屑中的果膠分子會與鈣離子結合行成穩定不容於水結構，但加入草酸銨後銨離子合取代果膠與鈣離子的結合 使果膠能溶於水 能與木屑分離 由於進行實驗中所使用的錐形瓶容量太小 會導致反應物整體受熱不均勻，所以必須調節溫度的大小。(此步驟反應兩小時)
下午
待兩小時冷卻後 木屑與草酸銨反應完畢 此時的草酸銨溶液呈現深褐色，因為pectin以溶解於草酸銨中，進行抽器過濾法取出木屑(此步驟進行兩次)，接著粗秤木屑得到114.4g的木屑，由於與溶液反應所以得到的木屑比昨天所取的乾燥木屑還要重，我取57.7g的木屑進行實驗(錐形瓶太小給分兩次進行) 加入蒸餾水375g(步將蒸餾水加滿是因為 H2O2與 NAOH反應會產生氣泡) 分別用pH=10跟pH=7的緩衝液校正pH計 (實驗要在pH=12.5左右進行) 配置4M的NAOH 100 ml(取NAOH 16克)，將木屑加水放到三孔錐形瓶放置在油層上 最下方放置加熱磁石攪拌器維持50度C左右，三孔堆瓶分別放入pH計、冷凝管、NaOH滴定管，加入H2O2 26.6 ml 開始慢慢滴入NaOH並測量，當pH達到11時已開始有反應 接著慢慢加入NaOH 使pH值達到12.45 放置16小時 讓反應完全。
7/24
7/24 星期五
與Charoltte繼續昨天的實驗
經過大約16小時的反應，錐形瓶內反應物(NAOH+H2O2+木屑)已經反應完全，(已經無大量的泡沫、顏色呈現乳白色)，將木屑抽氣過濾，濾出黃色的濾液後，
將木屑在水稀釋至中性(用Ph試紙檢驗 深藍→無色)，此步驟是除去多餘的鹼，以免影響木屑中的纖維質，而木屑需加入24%KOH並放在室溫下24小時，才能在進行萃取(取出cellulose)。
取出黃色的濾液( 1.5L ) 加入HCl (10%、25%(一半))作酸鹼中和。也要使濾液達到中性，避免影響濾液中的Hemicellulose
將濾液分兩次放入EVAPORATOR(旋轉蒸發儀)中(原理：真空狀態下，壓力降低 讓溶液的沸點降低 藉此來分離溶液中多餘的溶劑)，一開始由於水的汽化不均勻，產生大量的泡沫，必須隨時調整蒸發儀的壓力，以免抽出泡沫中的溶質，此步驟需花很長的一段時間。
下午
取出濾液( 300m l)並加入三倍體積的乙醇，讓濾液中的Hemicellulose溶於乙醇
使其沉澱(放入冰箱)。
由於實驗室儀器的更動，所以無法做到將Hemicellulose放入離心機的部分，所以Charlotte跟我解釋了整個實驗的流程的原理，讓我更了解這個實驗的原理及步驟。
7/27 星期一
今天我和研究生Cyril Ringot做層析的實驗 要把porphyrin作純化
Cyril 主要在研究PACT(PhotoAntimicrobial ChemoTherapy) 光動力抗菌療法
porphyrin 和 cellulose結合成光敏感物質 接受hv光線後 會把氧氣轉換成singlet oxygen 藉此來殺死細胞上的細菌。
我們以丙酮當洗滌用溶劑清洗層析管，將棉花用鐵棍塞到最底層，在不將鐵棍移開的情況下，倒入沙子，使沙子平均散佈在底層，接著取silicium至燒杯中約450ml，由於silicium的顆粒極小，容易飄到空氣中且吸入對人體的肺部有害，所以要戴口罩並在抽氣室裡進行，並加入約800ml的的CH 2C l2 攪拌均勻，沿管壁倒入層析管中，並加入約400ml 的CH 2C l2將燒杯中的silicium 溶解乾淨並倒入層析管中，最後在以小杯的CH 2C l2 清洗管壁，要使silicium及CH 2C l2溶液在層析管中大概佔有20~25公分的面積，用導管接上空氣壓力(0.25 bar)到層析管中，使CH 2C l2能更快地往層析管底部流，使silicium及CH 2C l2溶液集中固定在層析管中，由於時間要接近下課了 所以我們暫時關掉層析管，讓實驗在明天進行。
7/28 星期二
和研究生Cyril繼續進行純化porphyrin 的實驗
讓CH 2C l2流至層析管底部後，倒入10當量 florisil(60-100 mesh)到silicium及CH 2C l2混合溶液，能形成膠狀的分子網，只能允許小分子通過，接著倒上一層沙子，最後放入一層不純的porphyrin，在覆蓋一層沙子及加上大量的CH 2C l2，並加上空力壓(0.3 bar)，開始進行今天的層析實驗，由於CH 2C l2 流動的相當快，所以在層析的過程中，必須一直加入CH 2C l2溶液。可以觀察到顏色較深的porphyrin已經開始慢慢往下移動。
大約5小時後，porphyrin的層析液已經達到底層，我們用8個錐形瓶去乘裝，將前4個錐形瓶裡的porphyrin去做TLC(薄層層析)，將4瓶porphyrin分別在薄板上點4點，放入EtOH /CH 2C l2(98:2)溶液中，觀察porphyrin在薄板上的移動，得知他們是純度相同的porphyrin，後4瓶的porphyrin也作TCL，發現也和前4瓶的porphyrin相同，所以將他們用CH 2C l2 清洗至一個大錐形瓶中，置於旋轉蒸發儀中，將溶劑除去，即可得到純化的porphyrin。
在等待層析的過程中，Cyril將帶有porphyrin 的cotton修剪後，放入油浴中，裝上冷凝管及加熱器(60度、25小時)，此步驟是要洗去沒鍵結完全的porphyrin，清洗完成後即為PACT產物。
7/29、7/30
時間真的過的很快，這是我們在法國實習的最後一個禮拜
由於實驗已經全部結束，但由於語言上的不同，讓實習的內容有些不了解
所以我用最後的這幾天，將先前不懂的問題向帶領我的研究生問清楚
雖然英文能不是很好，所以很多情況下用畫的或用寫的才能讓對方明白
幸好透過多次的溝通，讓我更能明白他們在說些什麼，使我更能明白實驗的內容
7/31
下午教授 Gloaguen 抽空來幫助我明白的一些關於AVRUL問題
來這裡實習有大部分的 時間是 教授Gloaguen在帶我 實在是非常的感謝他
由於已經是暑假期間 大部分的教授已經去度假了，而教授 Robert還留在實驗室
最後他開了一瓶香檳與我們這次來LIMOGES大學的教授及學生們分享
作一個道別並也祝福我們的課業 也非常謝謝他
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